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ELISA试剂盒是检测抗体还是抗原
2024-6-21
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在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:我们测定ELISA试剂盒到底是检测抗体还是抗原?根据天津睿创实验过程分析,对这两种抗体,抗原分别作了测试,大家可以根据我们给出的结果做个对别,从而分辨出ELISA试剂盒到底是检测抗体还是抗原?1.检测抗原常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中...
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ELISA试剂盒样本内源性干扰因素介绍-威廉希尔
2024-6-3
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内源性干扰因素,包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。一、类风湿因子在类风湿患者及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的类风湿因子(RF),其一般为IgM型,亦有IgG和IgA型,具有与变性IgG产生非特异结合的特点,因为在ELISA测定中,其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合,从而出现假阳性结果。避免其发生的方法有:1.用F(ab)2替代完整的IgG。2.标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理。3.检测抗...
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为什么恒温扩增可取代变温PCR?
2024-5-28
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依赖核酸序列的扩增技术(NASBA)是在PCR基础上发展起来的一种新技术,是由1对带有T7启动子序列的引物引导的连续、等温、基于酶反应的核酸扩增技术,反应在41℃进行,可以在2h左右将模板RNA扩增约109倍,比常规PCR法高1000倍,不需特殊的仪器。该技术一出现就被用于疾病的快速诊断和病人血清中HIV-1的定量检测。尽管RNA的扩增也可以使用反转录PCR技术(通过反转录形成单链DNA模板),NASBA相比则有自己的优势:可以在相对恒温的条件下进行(一般恒温为41℃)。该技...
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elisa试剂盒的分类及优缺点-威廉希尔
2024-5-12
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elisa试剂盒根据其应用和设计可以分为以下几类:一、直接elisa试剂盒:*特征:使用标记有酶的抗体直接与样本中的抗原结合,无需二抗。*优点:操作简便,反应时间短。*缺点:可能存在抗体与抗原结合位点的竞争,影响灵敏度。二、间接elisa试剂盒:*特征:使用未标记的抗体捕获样本中的抗原,然后使用标记有酶的二抗进行检测。*优点:灵敏度高,可以通过使用不同的二抗来放大信号。*缺点:操作步骤较多,可能增加背景噪音。三、夹心elisa试剂盒(三明治ELISA):*特征:使用两种抗体,...
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威廉希尔为您讲解人细胞ELISA试剂盒的基质效应
2024-5-9
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在人细胞ELISA试剂盒实验中,我们或多或少会遇到样本浓度接近试剂盒灵敏度,样本OD450值低于空白值的现象,尤其是血清和血浆样本,这可能是基质效应的结果。那么什么是基质效应呢?基质是指除目标分析物之外的样品部分。因为基质成分会显著干扰分析过程,影响分析结果的准确性。这些效应在业内统称为矩阵效应。这是人细胞ELISA试剂盒研发和使用中需要避免的雷。当单个样品或少量样品的数值低于空白值时,可能是实验操作中出现了问题。这时候就要增加重复,提高操作技术。当许多样品低于空白值时,应考...
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科研荧光定量PCR的应用领域
2024-5-7
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荧光定量PCR的应用领域:1、核酸定量分析:对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测,比如近期流行的甲型H1N1流感,转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等。2、基因表达差异分析:比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA芯片或差显结果的确证3、SNP检测:检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体对特定药物的不同反应有着重要的意义,因分子信标结构的巧...